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茁彩生物|一步法Elisa換新裝

發(fā)布時間: 2022-02-23  點擊次數(shù): 1318次

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首先,帶大家溫故下酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫ELISA),此方法可用于研究領(lǐng)域中的許多靶標,包括細胞因子,趨化因子,生長因子,磷酸特異性靶標,免疫球蛋白,免疫腫瘤學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)。由于技術(shù)方法成熟,操作流程簡單,此方法學(xué)深受廣大科研工作者青睞。

那么,ELISA實驗中具體又分為哪幾種檢測類型呢?

01 夾心法


①將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次;

②加待測抗原,如兩者是特異的,則發(fā)生結(jié)合,然后把多余抗原洗除;

③加入與待測抗原呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體,使形成“夾心";

④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生,說明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原。

02 間接法


此法是檢測抗體常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體上,加入待測血清(抗體)與之結(jié)合,洗滌后,加酶標抗體和底物進行測定。

03 競爭法


此法主要用于小分子物質(zhì)、激素、藥物及半抗原的定量測定。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體上,加入待測抗原和一定量的已知酶標抗原,使二者競爭地與固相抗體結(jié)合,經(jīng)過洗滌分離,最后結(jié)合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關(guān)。

到這里我們應(yīng)該會問一句,什么叫“一步法" ?

不要著急,小Z先用“一步法"跟傳統(tǒng)方法做個對比:

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以上圖例,相信大家很明顯的看出“一步法"優(yōu)化了操作步驟,縮減了操作時間,避免了不必要的誤差。

此刻你們腦海里面應(yīng)該飄過很多問號吧?



小Z再給你們剖析一下“一步法" 優(yōu)化方案

  • 梯度標準品(即用型)試劑盒提供已知濃度的6支標準品,可直接使用;

  • 樣本充足的情況下,離心后可以直接加樣,無需樣本稀釋,避免污染;

  • 一次性洗板,簡約時間,減少誤差;

  • 直接讀數(shù),90分鐘搞定ELISA,實現(xiàn)時間上“質(zhì)"的飛躍;

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