無血清細胞凍存液是一種用于保存細胞的液體,它不含血清,但含有一定濃度的糖、鹽和蛋白質(zhì),以及一定濃度的抗凍劑,可以有效地防止細胞凍傷,通用于各種動物細胞株(腫瘤細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。
無血清細胞凍存液對細胞凍存步驟:
1、常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。
2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù)。
3、將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5分鐘離心收集培養(yǎng)細胞沉淀,棄去離心管中的上清液。
4、加入適量的細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度約為5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞,制成細胞混合液。
5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管1ml或1.5ml。
6、直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。
7、如果想液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時間,方可移至液氮罐中保存。
無血清細胞凍存液用途如下:
1、用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存。
2、用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。
3、用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。