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土壤微生物生物量碳(MBC)含量檢測-重鉻酸鉀外加熱法

發(fā)布時間: 2024-02-23  點擊次數(shù): 395次

土壤微生物生物量碳(MBC)是指土壤中所有活體微生物身體所含的碳元素的總和,其與土壤有機碳(SOC)共同體現(xiàn)了土壤中有機質(zhì)的含量情況,在土壤有機碳庫中占有至關(guān)重要的地位。土壤微生物生物量碳在自然界的碳循環(huán)中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用,它是全球碳循環(huán)中的一個重要碳庫,能夠參與碳的分配和轉(zhuǎn)化。同時,土壤微生物生物量碳還能夠作為評價土壤質(zhì)量、土壤肥力和土壤健康狀況的重要指標。

圖片7.png

 

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操作步驟

1)土壤樣品熏蒸 

稱取相當于 5 g 烘干土重的鮮土,放入培養(yǎng)皿中,連同盛有50 mL 無乙醇氯仿的小燒杯(里面放入少量碎瓷片或小玻璃珠,防止暴沸),和盛有 30mL 1mol/L NaOH 的小燒杯一起放入真空干燥器內(nèi)(一次可放入 40 個左右的培養(yǎng)皿)。用少量凡士林密封干燥器,抽真空,使氯仿沸騰,并持續(xù) 2 min 以上,關(guān)閉真空干燥器的閥門,然后將真空干燥器放入 25℃暗室中,保持 24h。24 h 后,取出盛有氯仿(倒回瓶中重復使用)和 NaOH 的小燒杯。再用真空泵反復抽氣 4 次,每次 3 min 以上,直到土壤聞不到氯仿味為止(并不安全的做法,建議抽氣時間延長,次數(shù)3次即可)。另稱取與熏蒸處理組數(shù)目等量的培養(yǎng)土壤放入另一干燥器中,但不熏蒸,作為對照土壤。

2)土壤微生物碳的測定

從干燥器中取出土樣,放入80 mL 塑料瓶中,加入 0.5mol/L K2SO4溶液 100 mL(1:4 土水比),振蕩 30 min(25℃,200 r/min-1)后迅速用定性中速濾紙過濾,濾液立即測定或-15℃下保存。吸取5 mL浸提液于100 mL 油浴管(高硼硅玻璃管),加入10 mL 0.018 mol/L K2Cr2O7 - H2SO4溶液(H2SO4 濃度為 12mol/L)【注意:浸提液的量根據(jù)土壤微生物碳量考慮,一般越高,取用浸提液越少,這塊需要進行多梯度的預實驗,確定最佳浸提液與K2Cr2O7 - H2SO4添加量比值】,放入少量石英沙(防暴沸),搖勻后置于 175 ± 1℃的油浴鍋中(一般建議選用二甲基硅油)煮沸保持 10 min,冷卻后將溶液轉(zhuǎn)移到 150 mL 的三角瓶中,使總體積約為 80 mL,加一滴鄰啡羅啉指示劑(注:如果油浴后溶液呈深綠色,滴加1/3滴的鄰菲羅啉,滴管輕輕碰觸三角瓶內(nèi)壁即可),用 0.05 mol/L FeSO4溶液滴定至終點。


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